生物工程实验指南——综合实验原理与实践 科学出版社 下载 pdf 百度网盘 epub 免费 2025 电子版 mobi 在线

本书是按照专业设置的生物工程实验教学新体系教学用书之一。全书分为实验和实训两部分。实验部分包括生物活性分子的分离、提取、鉴定及活性检测，微生物的分离纯化、鉴定及影响其生长的因素，基因的克隆、分子标记，产酶微生物筛选、产酶条件优化，酶的提取、固定与活性功能基团的化学修饰以及酶特性分析，重组蛋白的制备，抗体的纯化与检测，外源基因的转染表达，细胞水平的药物筛选，淀粉质原料制备乙醇，抗生素、多糖、酸的发酵生产，植物组织培养。实训部分包括机械搅拌式发酵罐综合实训、物料的粗粉碎与超微细粉碎、产物分离精制综合实训。书后附有常用单位换算表、常用AFLP选择性扩增引物、几种植物外植体培养的培养基配方、过滤除菌法、生物工程常用试剂的配制、常用培养基的配制。本书可作为高等院校生物工程、生物科学、生物技术、生物制药专业本科生的教材，也可供相关专业技术人员参考。

第一篇实验部分

实验一磷脂的分离纯化3

实验1-1卵磷脂的提取3

实验1-2薄层层析法检测卵磷脂5

实验二红霉素的提取分离及效价测定9

实验2-1溶剂萃取法制备硫氰酸红霉素9

实验2-2大网格树脂吸附法提取红霉素12

实验2-3无机盐对再生型双水相体系萃取红霉素分配系数的影响15

实验2-4比色法测定红霉素效价18

实验三木姜叶柯黄酮的提取及测定22

实验3-1超声波辅助法提取木姜叶柯黄酮22

实验3-2乙醇回流法提取木姜叶柯黄酮24

实验3-3微波辅助法提取木姜叶柯黄酮26

实验3-4木姜叶柯黄酮的含量测定29

实验四超临界法萃取青蒿素及纯度测定32

实验4-1利用超临界CO2流体萃取青蒿素32

实验4-2HPLC法测定青蒿素纯度35

实验五番茄红素的提取分离及含量测定38

实验5-1蔬菜中番茄红素的提取分离38

实验5-2分光光度法测定番茄红素的含量40

实验六咖啡因的提取分离及测定43

实验6-1乙醇萃取法提取分离咖啡因43

实验6-2HPLC法检测咖啡因含量45

实验七微生物的分离纯化和鉴定48

实验7-1从土壤中分离和纯化微生物48

实验7-2利用细菌16SrDNA序列分析鉴定其属51

实验7-3细菌的生理生化反应56

实验7-4细菌生长曲线的测定59

实验7-5真菌ITS序列分析鉴定61

实验八环境因素对微生物生长的影响65

实验九小鼠TLR2基因的克隆68

实验9-1小鼠肝脏总RNA提取68

实验9-2RT-PCR、扩增产物纯化与琼脂糖凝胶电泳鉴定71

实验9-3RT-PCR产物克隆75

实验9-4转化子的筛选及PCR鉴定77

实验9-5重组质粒提取与酶切鉴定80

实验十AFLP分子标记实验技术84

实验10-1基因组DNA的制备、酶切及接头连接84

实验10-2PCR扩增及产物电泳鉴定87

实验十一酸性磷酸酯酶的特性分析93

实验11-1酶促反应进程曲线的制作和酶活力测定93

实验11-2酸性磷酸酯酶的Km和Vmax测定98

实验11-3离子交换层析法纯化酸性磷酸酯酶101

实验11-4SDS-PAGE测酸性磷酸酯酶的相对分子质量105

实验十二酵母蔗糖酶的提取与活性功能基团的化学修饰111

实验12-1酵母蔗糖酶的提取、分离与纯化111

实验12-2酵母蔗糖酶的包埋及固定化酶活性测定114

实验12-3酵母蔗糖酶活性功能基团的化学修饰117

实验十三产纤维素酶微生物筛选、产酶条件优化、纤维素酶基因的克隆分析119

实验13-1产纤维素酶微生物的分离与初步鉴定120

实验13-2产纤维素酶菌种的筛选与保藏122

实验13-3酶活测定与传代保藏124

实验13-4产纤维素酶菌种的紫外诱变育种127

实验13-5正交试验设计优化产纤维素酶菌种的产酶条件129

实验13-6产纤维素酶细菌菌株酶基因克隆分析133

实验十四酶的固定化、酶传感器、酶反应器及其应用137

实验14-1酶的固定化及酶传感器的制备及应用137

实验14-2酶反应器设计及酪蛋白水解物的制备139

实验14-3酶法澄清苹果果汁加工工艺优化142

实验十五多克隆抗体的纯化与检测145

实验15-1兔血清的分离145

实验15-2多克隆抗体的硫酸铵分级粗纯化148

实验15-3抗体的蛋白质G亲和纯化150

实验十六利用毕赤酵母制备重组蛋白154

实验16-1酵母转化子的活化及少量培养154

实验16-2重组茯苓免疫调节蛋白的镍亲和纯化156

实验16-3重组茯苓免疫调节蛋白的DEAE离子交换纯化158

实验十七外源基因在哺乳动物细胞中的表达162

实验17-1脂质体介导的外源基因细胞转染162

实验17-2蛋白质免疫印迹法检测外源基因在细胞中的表达164

实验十八基于细胞水平的药物筛选169

实验18-1MTT法检测药物对细胞活力的影响169

实验18-2平板克隆形成实验检测药物对细胞增殖的影响171

实验18-3划痕实验检测药物对细胞迁移的影响173

实验十九淀粉质原料乙醇发酵175

实验19-1淀粉质原料乙醇摇瓶发酵175

实验19-2乙醇的蒸馏178

实验19-3发酵液中乙醇含量的检测181

实验二十柠檬酸发酵184

实验20-1柠檬酸摇瓶发酵185

实验20-2柠檬酸的提取——柠檬酸钙的制备187

实验20-3柠檬酸的检测189

实验二十一α-淀粉酶发酵193

实验21-1α-淀粉酶摇瓶发酵193

实验21-2α-淀粉酶活力测定195

实验二十二青霉素发酵200

实验22-1青霉素摇瓶发酵200

实验22-2抗生素效价评定203

实验二十三茯苓多糖发酵及检测205

实验23-1茯苓多糖摇瓶发酵205

实验23-2茯苓多糖的提取208

实验23-3硫酸-苯酚法测定茯苓多糖210

实验二十四植物组织培养213

实验24-1MS培养基母液和培养基的配制213

实验24-2外植体灭菌、接种与培养218

实验24-3继代培养221

实验24-4愈伤组织再分化芽的培养223

实验24-5生根培养225

实验24-6试管苗的驯化与移栽230

实验24-7植物细胞悬浮培养233

第二篇实训部分

实训一机械搅拌式发酵罐综合实训239

实训1-1发酵罐结构的认知239

实训1-2发酵罐的灭菌240

实训二物料的粗粉碎与超微细粉碎243

实训2-1粗粉碎243

实训2-2超微细粉碎244

实训三产物分离精制综合实训246

实训3-1高速管式离心机246

实训3-2降膜式蒸发器247

实训3-3喷雾干燥249

主要参考文献251

附录1常用单位换算表253

附录2常用AFLP选择性扩增引物254

附录3几种植物外植体培养的培养基配方255

附录4过滤除菌法258

附录5生物工程常用试剂的配制260

附录6常用培养基的配制271

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